消毒處理后、無菌試驗前和操作過程中，需要檢查空氣中的菌落數(shù)，以判斷無菌室是否達到規(guī)定的潔凈室檢測標準要求，其中最常用的檢測方法是沉降菌法。一般要求無菌室空間潔凈度達到萬級。
一、沉降菌的檢測方法
將三塊營養(yǎng)瓊脂平板以無菌方式帶入無菌操作室，在操作區(qū)臺面左、中、右各放置一盤；打開板蓋，暴露在空氣中30分鐘，蓋上板，置于36℃±1℃孵育48h，取出計數(shù)。
二、無菌室的滅菌方法
1、紫外線輻射
紫外線殺菌是利用適當波長的紫外線破壞微生物細胞內(nèi)的DNA或RNA結(jié)構(gòu)，使生長中的細胞死亡而達到殺菌效果，屬于物理殺菌方法。這種方法可以殺滅多種微生物，包括細菌、病毒、真菌、立克次體和支原體等，是實驗室最常用的滅菌方法。根據(jù)衛(wèi)生部2002年發(fā)布的《消毒技術(shù)規(guī)范》，對紫外線燈的要求是紫外線強度不低于70uW/c㎡（距離紫外線燈1m），紫外線燈在布置空間每平方米不應(yīng)低于1.5W。
2、臭氧殺菌
臭氧是一種強氧化劑，通過氧化分解細菌內(nèi)部葡萄糖所需的酶來滅活和殺死細菌。用臭氧殺菌，殺菌徹底，無殘留，殺菌廣譜，可殺滅細菌繁殖體和孢子、病毒、真菌等，并可殺滅肉毒桿菌病毒。此外，臭氧對霉菌有很強的殺滅作用。臭氧空氣消毒必須在室內(nèi)無人的密閉空間進行，消毒后至少30分鐘后方可進入。一般殺菌時間可選擇30分鐘，要求空間臭氧濃度不低于20mg/m3。
3、化學(xué)熏蒸
利用易揮發(fā)和汽化的化學(xué)物質(zhì)蒸汽殺滅太空微生物，如甲醛、過氧化氫和過氧乙酸。這種方法的明顯缺點是容易殘留，對人體有害。每次熏蒸后，使用前至少需要通風24小時。因此，只有在其他滅菌方法達不到理想的滅菌效果時，才會考慮采用這種方法。
無菌室一般用于微生物檢測，每個質(zhì)檢人員都必須了解其狀態(tài)，以保證實驗結(jié)果的準確性。因此對于此類無菌室需要做好潔凈室檢測以及消毒工作。
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